真核生物的转录真核生物的转录和原核转录的不同点：(1)原核只有一种RNA聚合酶，而真核细胞有三种聚合酶；(2)启动子的结构特点不同，真核有三种不同的启动子和有关的元件；(3)真核的转录有很多蛋白质因子的介入。1.真核生物的RNA聚合酶RNApolIRNApolIIRNApolIII分布核仁核质核质亚基种类6～138～1110～15分子量500～600550～650600～700主要产物rRNA前体mRNA前体tRNA和5SrRNA前体最适Mg离子浓度205～105～10α-鹅膏蕈碱不敏感低...
基因转录调节基因转录调节基因转录调节通过特异DNA序列、与特异DNA序列结合的调节蛋白和RNA聚合酶相互作用实现。一、特异DNA序列及其结合蛋白真核生物基因组中含有可以调控自身基因表达活性的特异DNA序列，称为顺式作用元件。顺式作用元件能够被转录调节蛋白（反式作用因子）特异识别和结合，从而影响基因表达活性。启动子顺式作用元件又分增强子沉默子1.11.1启动子启动子（（PromoterPromoter）是）是RNARNA聚合酶聚合酶结合位...
RNA的生物合成（转录）转录(transcription):是指以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶催化下，以4种NTP（ATP、CTP、GTP和UTP）为原料，合成RNA的过程。编码链（非编码链）模板链并非永远在同一条单链上转录方向5335模板链编码链编码链模板链转录方向DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因。结构基因：RNA聚合酶共同特点是：①以核糖核苷三磷酸（rNTP）为底物；以DNA为模板；②按5′→3′方向合成；③无需引物能从头（...
第二章DNA的结构第一节DNA的一级结构互补双链：绝大多数生物的DNA线状单链：噬菌体、病毒DNA单链环状：M13、ΦX174环状双链闭合环状：细菌染色体DNA、mitDNA、chlDNA、病毒DNA质粒两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，碱基排在内侧；两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对。A＝T，G≡CDNA在碱性条件下稳定性强，不断裂。pH=11.5时仍稳定，而RNA易被碱水解。DNA一级结构对高级结构的影...
真核生物DNA复制(DNAreplicationinEukaryote)1、复制概况a、多个复制起始点，双向复制b、复制子相对较小(14-100kb)，复制速度较慢，大约50bp/minc、复制终止通过复制叉的相遇而终止•已发现的真核生物DNA聚合酶有15种以上。•在哺乳动物细胞中主要的聚合酶酶可能的作用DNA聚合酶α引发两条链的复制DNA聚合酶δ延伸后随链DNA聚合酶ε延伸前导链DNA聚合酶βDNA修复DNA线粒体DNA的复制εδ真核生物DNA复制叉上发生的事件末端隐缩真...
DNA测序技术第三节人类基因组计划1990年美国、英国、法国、德国、日本和我国科学家共同参与历时16年花费，花费30亿美元1990年美国、英国、法国、德国、日本和我国科学家共同参与历时16年花费，花费30亿美元人类基因组计划方法克隆法方法克隆法方法克隆法方法克隆法塞莱拉公司-鸟枪法测序技术的发展一、双脱氧末端终止法测序长度1000bp准确率99.999%成本高通量低不能大规模应用双脱氧法第一代全自动激光荧光DNA测序仪...
基因表达调控基因表达调控（（RegulationofGeneExpressioRegulationofGeneExpressionn））一、基因表达的概念一、基因表达的概念基因表达是指生物体基因组中结构基因所携带的基因表达是指生物体基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录及翻译等一系列过程，合成特定遗传信息经过转录及翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质或的蛋白质或RNARNA，进而发挥其特定生物学功能的全，进而发挥其特定生物学功能的全过程。过程。基因表...
第三章基因组和基因第一节基因组与C值矛盾一、基因组一个生物物种所有染色体的总和（细胞遗传学）所有核酸分子的总和（分子遗传学）所有基因的总和（经典遗传学）指导一个物种的结构与功能的所有遗传信息的总和（现代分子生物学理论）二、C值一个单倍体基因组的DNA含量。单位为dolton或uug或bp1uug=1pg=6.1×1011dolton对每一个物种，C值是恒定的。三、C值矛盾一般而言，随着生物的进化，生物体的结构与功能越复杂，其C...
BacterialDNAreplication原核生物DNA的复制DNA聚合酶I(codedbypolA)不是复制大肠杆菌染色体的主要聚合酶，它有3’→5’核酸外切酶活性,保证了DNA复制的准确性。DNAPolymeraseI它的5’→3’核酸外切酶活性也可用来除去冈崎片段5端RNA引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。DNA聚合酶II(codedbypolB)的活性很低，只有DNA聚合酶I的5%，所以也不是复制中主要的酶。生理功能主要是起修复DNA的作用。DNAPolymeraseII...
真核基因的结构第一节1.真核基因包含编码蛋白质或RNA的编码序列及其与之相关的非编码序列。2.真核基因结构最突出的特点是其不连续性。一、真核基因的基本结构3.高等真核生物绝大部分编码蛋白质的基因都有内含子，但组蛋白编码基因例外。编码rRNA和一些tRNA的基因也都有内含子。一、真核基因的基本结构4.外显子与内含子接头处有一段高度保守的序列，即内含子5′末端大多数以GT开始，3′末端大多数以AG结束，这一共有序列是真核基...
第七章PCR技术Polymerasechainreaction，聚合酶链式反应PCR的最早设想：1971年，Korana最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆基因”。PCR的实现：1983年，美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的科学家K.B.Mullis等人发明了PCR，又称为基因的体外扩增法。1985年公开报道1987年PCR得到美国的专利权1989年PCR技术被“Science”杂志评为十大科技新闻之一1993年M...
DNA的复制生物所以有遗传现象，是与遗传物质DNA的复制有关系的。一、DNA复制的一般特征1、半保留复制模式2、半不连续复制3、需要RNA引物4、双向复制1、DNA半保留复制三种不同的复制假设模型(引自S.Simmons2003)2.半不连续复制Semi-discontinuousreplicationLeadingstrandLaggingstrandReplicationfork前导链的连续复制和滞后链的不连续复制在生物界是有普遍性的，因而称之为DNA的半不连续复制。Semi-discontinuousreplication半...
目录第九讲细胞信号转导的分子机制TheMolecularMechanismofCellularSignalTransduction目录肢端肥大症和巨人症分泌生长激素（GH）过多的垂体腺瘤中，有30～40%是由于编码Gsα的基因突变所致，其特征是Gsα的精氨酸201被半胱氨酸或组氨酸取代；或谷氨酰胺227被精氨酸或亮氨酸取代，这些突变抑制了GTP酶活性，使Gsα处于持续激活状态，cAMP含量增多，垂体细胞生长和分泌功能活跃。目录概述单细胞生物——直接作出反应多细胞生物—...
第一章绪论一、分子生物学的概念1945年，WilliamAstbury首先使用分子生物学这一术语。是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子上阐述这些大分子之间的相互作用的关系及基因表达调控机理的科学。是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。二.分子生物学的研究内容结构分子生物学、基因表达调控研究、生物信息学、DNA重组技术三.分子生物学简史四...
目录RNA聚合酶目录RNA聚合酶催化的反应及特点1.RNA聚合酶（RNApol）催化的反应1.RNA聚合酶（RNApol）催化的反应(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi2.RNA聚合酶的特点•只有5→3的聚合酶活性，无3-5外切酶活性•RNA聚合酶不需要引物就可以直接启动RNA合成•能促进DNA双链解链形成单链•其底物是NTPs•RNA聚合酶结合模板的特殊序列（启动子）2.RNA聚合酶的特点•只有5→3的聚合酶活性，无3-5外切...
第10课时分子生物学技术第四章生物化学与分子生物学技术实践1学习导航1.结合教材了解PCR技术的基本操作。2.理解PCR扩增DNA片段的原理。3.结合教材，尝试进行目的DNA片段的体外扩增。重难点击1.了解PCR技术的基本操作。2.理解PCR的原理。2一、使用PCR仪的安全措施和PCR反应程序二、目的DNA片段的体外扩增与鉴定内容索引当堂检测3一、使用PCR仪的安全措施和PCR反应程序41.DNA分子的结构(1)写出各个标号的名称：①；②；③；④；⑤...
第三章：层析技术第三章层析技术第1页第1页•层析技术是利用混合物中各组分物理化学性质(分子形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分派系数等)不同，使各组分以不同程度分布在固定相和流动相中，当流动相流过固定相时，各组分以不同速度移动，而达到分离技术。•层析技术操作简便，样品可多可少，既可用于试验室研究工作，又可用于工业生产，还可与其它分析仪器配合，组成各种自动分析仪器。第2页第2页层析技术分类(1)按...
第一章绪论分子生物学分子生物学旳基本含义(p8)分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子旳形态、构造特性及其重要性、规律性和互相关系旳科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界旳奥秘，由被动地适应自然界转向积极地改造和重组自然界旳基础学科。分子生物学与其他学科旳关系分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科互相渗透、综合融会而产生并发展起来旳，凝聚了不一样...
分子生物学复习资料第1页第1页APsite:全部细胞中都带有不同类型，能够识别受损核苷酸位点糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上N-β糖苷键，在DNA链上形成区去嘌呤或去嘧啶位点，统称为APsite。cDNA:在体外以mRNA为模板，利用反转录酶和DNA聚合酶合成一段双链DNACvalue：通常是指一个生物单倍体基因组DNA总量，以每细胞内皮克数（pg）表示第2页第2页Cvalueparadox：也称为C值谬误。值指C值往往与种系进化复杂性不一致现象，即...
核酸构造与功能一、填空题1．病毒ΦX174及M13旳遗传物质都是单链DNA。2．AIDS病毒旳遗传物质是单链RNA。3．X射线分析证明一种完整旳DNA螺旋延伸长度为3.4nm。4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）旳亲和力5．天然存在旳DNA分子形式为右手B型螺旋。二、选择题（单项选择或多选）1．证明DNA是遗传物质旳两个关键性试验是：肺炎球菌在老鼠体内旳毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个试验中重要旳论点证据是（C）。A．从被感染旳生物体内...
