NY∕T 4422-2023 牛蜘蛛腿综合征检测 PCR法VIP

PCR技术的原理、操作及应用[33页]

PCR技术的原理、操作及应用PCR技术的原理、操作及应用湖南省疾病预防控制中心微生物检验科黄一伟什么是PCRPCR:Polymerasechainreaction，即聚合酶链反应是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术PCR技术的发展历史1985关于PCR的文章首次由美国科学家KaryMullis等人在《Science》杂志上发表1989《Science》杂志报道了耐热性DNA多聚酶Taq酶（生活在温泉中的水生嗜热杆菌内提取到的一种耐热的DNA聚合酶）的发现,预示着分子时代...

菌落PCR实验步骤

菌落PCR资料PCR,菌落,资料菌落PCR菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于，直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为含目的质粒的阳性菌落。操作简单，快接，阳性率较高，在转化鉴定中较常见。操作方法：1，挑取单个菌落，可以用高压灭菌的牙签。现在含抗性的平板上画线，做保种用，然后置于20ultriton－x100中搅和一下，将相应的菌和板子上的画线区做上对应的记号2，将装有20ulTritonx－100的EP管100度煮2分钟3...

PCR引物设计原则（共17页）

引物设计引物设计引物引物的重要性引物设计的原则引物与PCR引物设计软件如何使用PrimerPremier5.0引物同源性分析引物（引物（primers)primers)引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。→→←←3’3’5’5’SenseprimerAntisenseprimer引物的重要性引物的重要性在整个PCR体系中,引物占有十分重要的地位。PCR的...

PCR引物设计原理(最新版)

PCRPCR引物设计原理引物设计原理PCR反应一般由三个步骤组成：①模板的热变性；②引物复性到单链模板上；③热稳定DNA聚合酶催化的延伸变性在应用TaqDNA聚合酶进行PCR时，变性温度在94-95℃下进行，这也是TaqDNA聚合酶进行30个或30个以上PCR循环而活力不受到过多损失时能耐受的最高温度。有时把变性时间设计为5min，以便大分子模板DNA彻底变性的概率。对于GC含量为55%或更低的线性DNA模板，推荐PCR的变性条件是94-95℃变...

T∕CACM 1027.202-2021 人参配方颗粒PCR鉴别VIP

ICS11.020CCSC10团体标准T/CACM1027.202—2021人参配方颗粒PCR鉴别PCRidentificationofRenshenpeifangkeli2021-11-29发布2021-11-29实施中华中医药学会发布T/CACM1027.202—2021I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件.............................................

T∕CACM 1027.203-2021 法半夏配方颗粒PCR鉴别VIP

ICS11.020CCSC10团体标准T/CACM1027.203—2021法半夏配方颗粒PCR鉴别PCRidentificationofFabanxiapeifangkeli2021-11-29发布2021-11-29实施中华中医药学会发布T/CACM1027.203—2021I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件..........................................

T∕CACM 1027.201-2021 当归配方颗粒PCR鉴别VIP

ICS11.020CCSC10团体标准T/CACM1027.201—2021当归配方颗粒PCR鉴别PCRidentificationofDangguipeifangkeli2021-11-29发布2021-11-29实施中华中医药学会发布T/CACM1027.201—2021I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件.............................................

PCR实验报告实验分析

PCR实验报告实验分析RT-PCR实验报告逆转录PCRrt-PCR为反转录rcr(reversetranscriptionPCR)和实时PCR(realtimePCR)共同的缩写。逆转录PCR，或者称反转录PCR(reversetranscription-PCR,rt-PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在rt-PCR中，一条rna链被逆转录成为互补dna，再以此为模板通过PCR进行dna扩增。由一条rna单链转录为互补dna(cdna)称作“逆转录”，由依赖rna的dna聚合酶(逆转录酶)来完成。随后，dna的另一...

荧光定量PCR仪操作指南eppendorf

目录:,安全预防法2安装2。1交货包装2(2仪器的安装2.3功能性单元2。3。1Ma,terc,;lere,,,alplex,.,启动2。4.,re,,p,e,模块与热模块之间的连接,。,。,,,stercyc,erep,ea,,,ex与计算机之间的连接2.4。3与其它部件的连接2.4(4rea,plex软件的安装2。4。,。,安装主程序2.4(4(2数据恢复2.,。,.3开始,ealp,,x软件的运行3.操作,。,管理者登陆,。2登陆3。3用户变更3(4系统配置,.4。1对使用者的管理,(,。1。1新用户建立,(,。1.2编辑用户3。...

PCR实验室程序管理文件及标准化操作程序

程序文件的管理和维护制度1.目的:基因诊断程序文件是指导临床基因扩增检验活动的法规性文件，属内部受控文件，不得擅自修改、涂改，不得遗失、外借翻印。为保持其现行有效和持续适应性，并确立因条件变化进行修改的程序。2(编写依据:2.1ISO/IEC170250,1999《检测和校准实验室能力的通用要求》因卫生部《临床基因扩增检验实验室技术验收表(checklist)》是根据ISO/IEC17025而设计2.2卫生部《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》...

PCR程序文件

在控临床基因扩增检验实验室文件编号,WH5Y-5-PCR-201,218B版编制,审核,批准,生效日期,2011年9月20日武汉市医院检验科目录序号主题内容文件编号页码1各区域日常工作程序WH5Y-5-PCR-20122温度、湿度监控和记录程序WH5Y-5-PCR-20243清洁消毒程序WH5Y-5-PCR-20354生物安全及防护程序WH5Y-5-PCR-20465废弃物处理程序WH5Y-5-PCR-20576人员培训程序WH5Y-5-PCR-20687数据保护程序WH5Y-5-PCR-20798试剂和实验用品购买、验收和储存程序WH5...

PCR 程序文件

精品在控临床基因扩增检验实验室程序文件文件编号:WH5Y-5-PCR-201～218B版编制:审核:批准:感谢下载载精品生敁日期:2011年9月20日武汉市医院检验科感谢下载载精品目录序号主题内容文件编号页码1各区域日常工作秳序WH5Y-5-PCR-20122温度、湿度监控和记彔秳序WH5Y-5-PCR-20243清洁消毒秳序WH5Y-5-PCR-20354生物安全及防护秳序WH5Y-5-PCR-20465废弃物处理秳序WH5Y-5-PCR-20576人员培训秳序WH5Y-5-PCR-20687数据保护秳序WH5Y-5-PCR-2...

[工程科技]荧光定量PCR仪操作指南eppendorf

操作手册证书经授权的热量循环仪该仪器为经授权的热量循环仪，仪器序列号为:购买者需预先支付由RocheMolecularSystems公司持有的美国专利号为4683195，4683202及4965188的专利预付金以及由F.Hoffmann-LaRoche有限公司持有的美国国外的相关专利索赔金。该仪器用于进行聚合酶链反应(PCR)过程全程的本质特性的研究与开发。按产量支付的专利费用可以支付给应用生物系统，或者也可以通过购买授权试剂的方式来抵付。该仪器作为经授权...

PCR实验室标准操作规程SOP

精品文档目录申报文件一、临床基因扩增梱验实验室技术验收申请表二、《医疗机构执业许可证复印件》三、拟设置基因扩增梱验实验室医院的医疗卫生资源状冴对临床基因扩增梱验的需求情冴以及实验室运行的预测凾析四、拟设基因扩增梱验实验室的设置平面图五、实验室主要负责人简历表六、实验室工作人员一觅表七、主要仪器设备表八、拟开展的临床基因诊断顷目九、几点说明质量手册一、管理性程序:秳序文件的管理呾维护1PCR实验室管理...

PCR实验室标准操作规程

PCR文件编号:第1版编制:审核:批准:生效日期:2015年*月*日PCR实验室公正性声明1、坚持公正立场认真对待每一例检测，不受任何对检测工作质量有不良影响的、来自实验室内部或外部的不正当的商业、财务和其他方面的压力和影响。避免卷入任何可能会降低技术能力、公正性、判断或运作诚实性的信任的活动。2、严格遵循实验室认可依据的国际标准，严格按标准的管理要素和技术要素的要求建立自我完善的管理体系和控制检测全过程各环节的...

实时PCR和RT-PCR解决方案

LUX?引物:实时PCR检测的多面手【摘要】通过使用单一荧光标记的LUX?引物，实时PCR能够检测到每次循环中所产生的扩增子。当累积到足够的检测数据后，根据起始模板拷贝数直接与时间点成比例的特性，我们可以精确地推算出模板DNA的起始拷贝数。LUX?(LightUponeXtension)的作用原理是基于一个位于一段特异序列3’末端附近的荧光基团，而该特异序列能够提供荧光淬灭。在PCR实验中，我们发现随着LUX?引物的延伸和双链产物的形成，被淬...

临床检验中心PCR实验室标准操作程序

****医院临床检验中心临床基因扩增实验室管理程序标准操作程序(SOP)起草人:批准人:生效日期:年月日目录临床基因扩增实验室的设置?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????4临床基因扩增实验室内部管理规章????????????????????????????????????????????????????????????????????????12临床基因扩增实验室人员管理、配置及培训?????????????????????????????????????????????????...

PCR引物设计原理

PCRPCR引物设计原理引物设计原理PCR反应一般由三个步骤组成：①模板的热变性；②引物复性到单链模板上；③热稳定DNA聚合酶催化的延伸变性在应用TaqDNA聚合酶进行PCR时，变性温度在94-95℃下进行，这也是TaqDNA聚合酶进行30个或30个以上PCR循环而活力不受到过多损失时能耐受的最高温度。有时把变性时间设计为5min，以便大分子模板DNA彻底变性的概率。对于GC含量为55%或更低的线性DNA模板，推荐PCR的变性条件是94-95℃变...

PCR技术原理[共57页]

1第五章PCR技术原理2定义：PCR技术又称聚合酶链式反应（polymerasechainreaction)，是通过模拟体内DNA复制的方式，在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。PCR技术:3PCR概念的提出1983，KaryMullis4引物引物MullisMullis的的构思构思DNADNA聚合酶聚合酶DNADNA聚合酶聚合酶特定特定DNADNA片段片段5Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段。不耐高温。6Heat-stablepolymeraseisvitaltotheeaseof...