外源基因表达基本过程合适的工具酶合适的载体宿主细胞合理的技术路线基因克隆的基本条件工具酶限制性核酸内切酶DNA聚合酶Ⅰ逆转录酶T4DNA连接酶碱性磷酸酶末端转移酶TaqDNA聚合酶限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease)定义：限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease,RE)是识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCCG+BamHⅠ限制性核酸内切酶(res...
外源基因表达概述外源基因表达指利用细胞内相关酶系统及其调控系统，将外源基因转录成mRNA，经加工后在翻译出相应的基因产物——蛋白质，再在受体细胞环境中经修饰而显示出相应的功能。外源基因表达的主要目的：要使目的基因在某一细胞中能得到高效表达，即产生人们所需要的高产目的的基因产物，如蛋白质、多肽类生物药物。外源基因表达基本原理根据外源目的蛋白的属性，选择相适应的表达宿主细胞。主要技术手段：基因工程技术...
实验七外源基因在大肠杆菌中的表达（或诱导表达）和检测一、【实验目的】通过本实验了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。要求掌握：1、什么是基因表达？掌握原核表达系统的工作原理2、根据pRSET质粒的特点，说明为什么需要诱导表达？了解工作原理。3、掌握表达产物（重组蛋白）的分析技术。二、【实验原理】将外源基因克隆在含有T7启动子的表达载体中，然后转化入大肠杆菌（E.coli）并使表达。先让宿主菌生长，lacI产生...
外源DNA和质粒载体的连接反应外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5磷酸和相邻的3羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5磷酸和3羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化,这两种酶就是大肠杆菌DNA连接...
第1页/共6页城市黑臭水体治理理念：外源掌握+内源掌握+提升自净力量+综合治理我国自“九五”期间开头启动重点流域水污染防治规划，经过近20年的治理，在大江大河水质改善的同时，城市中自然或人工形成的河流、河道和小型湖泊等水体，老百姓周边的毛细血管河流水质尚未好转，局部城市消灭多条黑臭水体，甚至城市区域内的主干线河流也消灭黑臭现象。水体黑臭是大局部国家工业化进展阶段产生的环境产物。国外兴旺国家在工业化、城...
