真核生物RNA的成熟l真核生物转录生成的RNA分子是初级RNA转录物(primaryRNAtranscript)，几乎所有的初级RNA转录物都要经过加工，才能成为具有功能的成熟的RNA。l加工主要在细胞核中进行。mRNA转录后加工•加帽•加尾•剪接一、加帽l帽子结构：7-甲基鸟嘌呤。l加帽需要的酶：加帽酶(cappingenzyme)和甲基转移酶(methyltransferase)催化完成。l帽子结构的位置：大多数真核mRNA的5’-末端5pppGp5GpppGppppGppi鸟苷酸转移酶5m7...
转录的模板及RNA聚合酶转录的概念：以DNA为模板合成RNA的过程。转录RNADNA一、转录的模板Ø转录的模板是DNA单链。Ø原核生物的转录单位是操纵子，真核生物的转录单位是一个结构基因。一、转录的模板Ø不对称转录：双链DNA分子，一股链作为转录的模板，而另一股链不转录；不同转录单位，转录模板并非总是在同一单链上。ØDNA双链中能够作为转录模板的链，称为模板链。Ø相对的另一股单链称为非模板链，其碱基序列与编码蛋白质氨...
原核生物RNA转录终止机制01转录的概念转录(Transcription)：是以DNA分子中一条链的部分片段为模板，按照碱基配对的原则，按5‘到3’的方向合成出一条与模板DNA链互补RNA分子的过程。02转录的终止是RNA聚合酶在模板上的某一位置停顿，RNA链从转录复合物上脱离出来。转录终止(Transcriptiontermination)指的是提供转录终止信号的DNA序列。终止子(Terminator)03转录终止的机制3.1不依赖Rho因子的()转录终止强终止子的结构特...
目录RNA的空间结构与功能StructureandFunctionofRNA目录RNA编码RNA非编码RNAmRNA组成性非编码RNA调控性非编码RNAtRNArRNAsnRNAsnoRNAscRNAlncRNAmiRNAcircRNAsiRNApiRNA目录信使RNA(messengerRNA,mRNA)是合成蛋白质的模板mRNA仅占细胞RNA总重量的2～5％种类繁多，其分子大小差别非常大成熟的mRNA由核不均一RNA(hnRNA)经过剪切后形成一、mRNA是蛋白质生物合成的模板目录ONNNNNH2OOCH3OHHHCH2HOPO-OOHNNNOH2NNOOHHHHCH2HO...
第11章RNA的生物合成11.2RNA转录后加工目录一、mRNA转录后加工二、rRNA转录后加工三、tRNA转录后加工原核生物转录过程中的羽毛状现象一、mRNA转录后加工真核生物mRNA转录后加工5端形成帽子结构；3端加上多聚腺苷酸(polyA)尾巴；剪接。5“帽子”PolyA3顺反子(cistron)5-m7GpppGpAAAAAAA-OH5端形成帽子结构(m7GpppGp)3端加上多聚腺苷酸(polyA)尾巴mRNA帽子结构的生理功能帽子结构参与翻译起始，帽子结构是...
第11章RNA的生物合成原核生物RNA转录RNA转录后加工11.1原核生物RNA转录目录一、RNA转录合成的特点二、RNA聚合酶三、原核生物RNA转录过程转录(transcription)：是以DNA分子中的一条链为模板，按碱基配对原则，合成出一条与模板DNA链互补的RNA分子的过程。转录RNADNA一、RNA转录合成的特点原料:NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)酶:RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol)转录的不对称性就是指以双链DNA中的一条链作为模板进行转录；或者某些区域...
4.3RNA的结构4.3RNA的结构主讲人姚正培讲师RNA的结构RNA是无分支的线形多聚核糖核苷酸主要以单链存在由A、G、C、U4种核糖核苷酸组成核苷酸中的戊糖是核糖RNA的核苷酸连接方式：3’,5’-磷酸二酯键天然RNA是单链线型分子RNA局部区域可形成双螺旋结构——“茎”局部双螺旋中A=U、G≡C，还存在非标准配对，如G与U配对。不能配对的区域形成突环（loop）突环与局部双螺旋区共同形成茎环结构（stem-loop）或发夹...
第五专题化学物质与生物分子的相互作用五、小分子化合物与RNA的相互作用•现代新药研究与开发离不开筛选模型，而筛选模型的关键是寻找、确定和制备药物筛选靶---分子药靶。选择确定新颖的有效药靶是新药开发的首要任务。•传统的小分子药靶多是蛋白质，近年来的研究表明同DNA的双螺旋结构相比，RNA结构具有令人惊奇的复杂性和多样性，同蛋白质一样形成复杂的三级结构，可成为新型小分子药物的作用靶点,为制药业提供了新的机遇。...
第五章DNA转录DNATranscription(RNASynthesis)5.1转录的基本概念5.2转录的特点5.3RNA聚合酶5.4转录过程5.5转录后加工5.6逆转录细胞核细胞质转录5.1转录的基本概念转录（Transcription）是遗传信息从DNA转变为RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链（模板链用于转录，编码链不用于转录）为模板，以A,U,C,G四种核糖核苷酸为原料，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。nonsensestrandCoding(sensestrand)转录仅以DNA的一条链作为模...
实验二动物组织总RNA抽提与定量一、【实验目的】1、学习总RNA分离的原理2、掌握Trizol法总RNA提取的方法二、【实验原理】Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，能够直接从细胞或组织中提取总RNA。Trizol内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。Trizol的主要成分是酚,主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。酚虽可有效地变性蛋白质，但是它不能完全抑制RNA酶活性，因此Trizol中还加入了...
调控RNA细菌中RNA介导的调控衰减子编码序列编码序列激活抑制sRNA的配对暴露出RBSsRNA的配对抑制核糖体结合编码序列编码序列•siRNA——源于活体的双链RNA前体或人工制备的小RNA•miRNA——细胞内基因编码的RNA前体衍生而来•piRNA——与piwi蛋白作用的小调控RNA，主要在生殖细胞中表达真核生物中的调控RNARNA干扰Double-strandedRNAinjectC.elegans无杂交探针的阴性对照亲本胚胎senseantisenseNature1998391:806-811Mex-3mRNAde...
目录RNA聚合酶目录RNA聚合酶催化的反应及特点1.RNA聚合酶（RNApol）催化的反应1.RNA聚合酶（RNApol）催化的反应(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi2.RNA聚合酶的特点•只有5→3的聚合酶活性，无3-5外切酶活性•RNA聚合酶不需要引物就可以直接启动RNA合成•能促进DNA双链解链形成单链•其底物是NTPs•RNA聚合酶结合模板的特殊序列（启动子）2.RNA聚合酶的特点•只有5→3的聚合酶活性，无3-5外切...
1.非编码RNA的分类及概念1.1分类非编码RNA(non-codingRNA)是指转录组中不翻译为蛋白质的RNA分子。包括相对分子量较小的核内小分子RNA(smallnuclearRNA,snRNA)、核仁小分子RNA(smallnucleolarRNAs,snoRNA)、微RNA(microRNA,miRNA)、piwi-interactingRNA(piRNA)干扰小RNA（SmallinterferingRNA,siRNA）以及相对分子量较大的长非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)等。1.2概念：snRNA：核内小分子RNA(smallnuclearRNA),它是真核生...
单股RNA病毒的复制RNA病毒核酸多为单股，病毒全部遗传信息均含在RNA中。根据病毒核酸的极性，将RNA病毒分为二组：病毒RNA的硷基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒。这种病毒RNA可直接起病毒mRNA的作用，附着到宿主细胞核糖体上，翻译出病毒蛋白。从正链RNA病毒颗粒中提取出RNA，并注入适宜的细胞时证明有感染性；病毒RNA硷基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒。负链RNA病毒的颗粒中含有依赖RNA的RNA多聚酶，可催化合成互...
RNAreplicationReversetranscription=replication1逆转录酶（reversetranscription)•1964年，Temin发现Rous肉瘤病毒等RNA病毒所造成的感染可被DNA合成抑制剂遏制。表明：RNA肿瘤病毒的RNA复制过程中要合成DNA。•Temin又发现放线菌素D能抑制致癌RNA病毒的复制，但不能抑制一般RNA病毒的复制。表明：转录对于RNA病毒增殖是必需的。2•Temin提出前病毒假说：原病毒DNA是RNA肿瘤病毒在复制和致癌中的中间物。•1970年，Temin在Rou...
RNA的生物合成过程一、选择题〔一〕A型题1．以下关于转录的表达正确的选项是A．转录过程需RNA引物B．转录生成的RNA都是翻译模板C．真核生物转录是在胞浆中进展的D．DNA双链一股单链是转录模板E．DNA双链同时作为转录模板2．DNA上某段编码链碱基挨次为5”-ACTAGTCAG-3”，转录后mRNA上相应的碱基挨次为A．5”-TGATCAGTC-3”B．5”-UGAUCAGUC-3”C．5”-CUGACUAGU-3”D．5”-CTGACTAGT-3”E．5”-CAGCUGACU-3”3．不对称转录是A．...
试验操作过程胡建和共6页第1页2023-4-28RiboMAXTMLargeScaleRNAProductionSystems-T7保存方法：避开反复冻融或者经常变换温度，以防影响产品稳定性。保存温度：-20℃试剂组成：ATP100µlCTP100µlGTP100µlUTP100µlRQ1RNAse-FreeDNase110U醋酸钠3.0M(pH5.2)1mlT7线性化比照DNA10µl酶混合物，T7RNA聚合酶120µlT75×转录缓冲液240µl无核酸酶水1.25ml质量把握：32P标记RNA除另外参加5µCiα-32PCTP400Ci/mmol之外，其它参照TB1...
