实验十一Western杂交（WesternBlot）一、【实验目的】了解蛋白质印迹的方法和操作要点。二、【实验原理】蛋白质印迹法一般是将SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质分子区带通过一定的方法转移并固定到一种特殊的载体上，使之成为稳定的、经得起各种处理并容易检出的固定化生物大分子，常用的转移方法有电转移、毛细管转移等，常用载体有硝酸纤维素膜（NC膜）、PVDF膜、尼龙膜等，它们与生物大分子都是共价结合。然后通过特异性...
实验十Northern杂交（NorthernBlot）一、【实验目的】(a)掌握NorthernBlot的基本原理(b)操作NorthernBlot的基本步骤二、【基本原理】Northern印迹是一种利用DNA与RNA进行分子杂交来检测特异性RNA的技术主要用来检测特定基因在转录水平上的动态表达。首先,将提取好的RNA(或mRNA)混合物通过琼脂糖凝胶电泳按它们的大小和分子量进行分离，分离出来电泳凝胶中的RNA转至尼龙膜或硝酸纤维素膜上，再与放射性或者其他非同位素化学标记...
实验九Southern杂交（SouthernBlot）一、【实验目的】(a)掌握SouthernBlot的基本原理(b)操作SouthernBlot的基本步骤二、【基本原理】Southern印迹是一种基于核酸特别是基因组DNA与DNA探针碱基互补配对特性的杂交技术，它是用来显示基因组DNA的状态，包括基因拷贝数和基因突变。该技术首先用一组特定的限制性内切酶将基因组DNA酶切成小的片段，再用琼脂糖凝胶电泳按照片段大小分离这些酶切产物，通常低电压和温度能够得到更好的...
WesternBlot详解(原理、分类、试剂、步骤及问题解答)Western免疫印迹〔WesternBlot〕是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进展检测。对表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进展检测，对基因的表达产物，可通过融合局部的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来具体地介绍一下WesternBlot技术:一、原理二、分类i.放射自显影ii.底物化学发光ECLECFiv.底物DAB呈色三、主要试剂四、主要步骤五、试验常见的问题指南1.参考书推举2.针对样品...
